Comment utiliser les ultrasons pour faciliter l’extraction des polysaccharides des champignons ?

Comment utiliser les ultrasons pour faciliter l’extraction des polysaccharides du champignon Agaricus bisporus ?

Domaine technique

La présente invention appartient au domaine technique de l'extraction de composants pertinents du genre Agaricus, et concerne spécifiquement un procédé d'extraction de polysaccharide d'Agaricus bisporus.

Technologie de base

Agaricus bisporus, également connu sous le nom de champignon, champignon étranger, champignon blanc, etc. en chinois, est souvent appelé champignon commun cultivé ou champignon de Paris à l'étranger. Agaricus bisporus appartient à Eumycota, Basidiomycotina, Hymenomycetes en taxonomie. La médecine chinoise estime qu’Agaricus bisporus est de nature fraîche, sucrée et non toxique. Les champignons pénètrent dans les intestins, l'estomac et les poumons et ont pour effet d'appétissant, de réguler le qi, de résoudre les mucosités, de plaire à l'esprit, de détoxifier, d'éliminer les éruptions cutanées, d'arrêter les vomissements, d'arrêter la diarrhée, de digérer les aliments, de clarifier l'esprit et de calmer le yang du foie. Il est principalement utilisé pour traiter la fatigue et la carence en qi aux stades moyen et avancé de la fièvre, de la bouche sèche, du manque d'appétit, de l'inhibition gastro-intestinale, des vomissements, de la diarrhée, de la toux avec mucosités et des éruptions cutanées médiocres chez les enfants. La recherche moderne montre qu'Agaricus bisporus est riche en protéines, polysaccharides, vitamines, nutriments et engrais. Il est non seulement nutritif et délicieux, mais possède également des fonctions antitumorales, anti-âge, antioxydantes et de régulation immunitaire. Les polysaccharides d'Agaricus bisporus ont des effets physiologiques tels que l'antibactérien, l'antioxydant, le renforcement immunitaire et l'inhibition de l'insuline. Le développement et l’utilisation des polysaccharides d’Agaricus bisporus ainsi que l’étude de leurs fonctions nutritionnelles et sanitaires seront les points chauds des futures recherches sur Agaricus bisporus.

Afin de résoudre les problèmes d'acide fort et d'alcali fort dans la technologie existante qui détruisent facilement la structure des polysaccharides, l'extraction d'étapes à haute efficacité, le processus complexe et la faible pureté des polysaccharides ; l'objectif de la présente invention est de fournir un procédé d'extraction assistée par sonde de polysaccharides d'Agaricus bisporus, c'est-à-dire de fournir un nouveau procédé d'extraction de polysaccharides d'Agaricus bisporus qui est efficace, économe en énergie et respectueux de l'environnement.

Le schéma technique permettant d'atteindre l'objectif de la présente invention est le suivant :

L'invention concerne un procédé pour un polysaccharide d'Agaricus bisporus assisté par une amorce, comprenant les étapes suivantes :

(1) Prendre de petits morceaux de solides frais d'Agaricus bisporus, les écraser à 60°C pour obtenir un matériau broyé ;

(2) ajouter de l'eau désionisée au matériau broyé de l'étape (1) dans un réservoir de réaction à sonde selon un rapport eau/matériau de 10 à 50 ml/g pour une extraction à l'eau chaude, la température d'extraction est de 20 à 80 °C, la durée est de 10 à 50 minutes et la puissance ultrasonique est de 80 à 200 W pour obtenir un extrait ;

(3) Centrifuger l'extrait de l'étape (2) et prélever le surnageant, les conditions de centrifugation sont : 5 000 tr/min, 15 min ; le précipité est extrait à nouveau par la même méthode, centrifugé, et le surnageant est prélevé, et les deux surnageants sont réunis ;

(4) Concentrer le surnageant de l'étape (3) à une température de 50°C à 1/10 du volume d'origine pour obtenir une solution concentrée ; ajoutez 3 fois le volume d'éthanol anhydre à la solution concentrée pour précipitation pendant 15 à 2 heures, centrifugez à 5 000 tr/min pendant 15 minutes et retirez le précipité ;

(5) Le précipité de l'étape (4) est déprotéiné par la méthode Sevag.

À une concentration de 5 mg/mL, le précipité de l'étape (4) est dissous par des ions, puis 1/5 du volume du mélange de chloroforme et de n-butanol est ajouté, et le rapport du chloroforme au n-butanol est de 5 : 1 ; agiter sur un shaker à 170 tr/min pendant 20 à 30 minutes, laisser reposer pendant 20 à 30 minutes et appliquer une couche pour former une phase solvant organique inférieure-protéine ; le surnageant est déprotéiné à plusieurs reprises 4 à 6 fois par le même procédé, et il n'y a aucune stabilité de couche de protéines entre les surfaces liquides supérieure et inférieure de la solution, et le surnageant est collecté ;

(6) Le surnageant de l'étape (5) est concentré à 1/5 du volume d'origine à une température de 50 ℃ pour obtenir une solution concentrée ; 9 fois le volume d'éthanol anhydre est ajouté à la solution concentrée pour la précipitation pendant 15 à 20 h, centrifugé à 5 000 tr/min pendant 15 min et le précipité est prélevé ;

(7) Le précipité de l'étape (6) est déprotéinisé par une résine macroporeuse. Méthode d'élimination des pigments

Ajouter la solution aqueuse ionisée au précipité de l'étape (6) à une concentration de 2 mg/mL, ajouter 1 g de résine macroporeuse AB-8 pour chaque 5 ml de solution, agiter sur un shaker à 170 tr/min pendant 12 h, laisser reposer pour éliminer la résine macroporeuse adsorbée avec le pigment, et récupérer le surnageant ;

(8) Concentrer le surnageant de l'étape (7) à une température de 50 ℃ et sécher sous vide à une température de 60 ℃ pour obtenir un extrait de polysaccharide d'Agaricus bisporus ;

Cet extrait polysaccharidique d'Agaricus bisporus est une poudre marron clair, dans laquelle la teneur en polysaccharides varie de 52,89 % à 75,48 %.

Les conditions optimisées de l'étape (2) ci-dessus sont un rapport eau/matériau de 30 ml/g, une température d'extraction de 65 ℃, un temps d'extraction de 40 minutes et une puissance ultrasonique de 170 W.

Comparé au procédé divulgué dans le brevet chinois n° 200810222270.1, le procédé de la présente invention présente les avantages suivants : 

① La valeur du pH de la méthode d'application pendant l'extraction est de 9 et la valeur du pH pendant la décoloration est de 4. Une telle opération avec un acide fort et un alcali fort peut facilement détruire la structure des polysaccharides ; la valeur du pH du procédé de la présente invention pendant l'extraction est proche de la neutralité, et les conditions sont douces et ne détruiront pas la structure des polysaccharides. 

② La méthode n'effectue pas de déprotéinisation pendant le processus d'extraction et la pureté des polysaccharides dans l'extrait n'est pas élevée (non garantie) ; le procédé d'extraction de ce procédé utilise le procédé Sevag pour la déprotéinisation, et les polysaccharides dans l'extrait sont exactement le contraire, soit 7. Le procédé de la présente invention présente les avantages suivants par rapport au procédé décrit dans la demande de brevet chinois n° 200910151176.6 : le procédé comporte des processus de traitement enzymatique, de traitement par micro-ondes et de filtration membranaire plus complexes que les étapes d'extraction de ce procédé, et le procédé comporte davantage de processus oxydants que le procédé d'extraction. De plus, les deux méthodes brevetées utilisent des graines fraîches d'Agaricus bisporus comme matière première d'extraction, qui sont facilement affectées par la saison de production ; le procédé utilise des graines d'Agaricus bisporus séchées et broyées comme matière première d'extraction limitée efficace, ce qui peut résoudre le problème de l'utilisation de matières premières fraîches affectées par la saison de production.

L' extrait polysaccharide d'A garicus bisporus est une poudre légère de cobalt, dans laquelle la teneur en polysaccharide varie de 52,89 % à 75,48 %.