Jak używać ultradźwięków do wspomagania ekstrakcji polisacharydów grzybowych?

Jak korzystać z ultradźwięków, aby pomóc w ekstrakcji polisacharydów grzybowych Agaricus bisporus?

Dziedzina techniczna

Niniejszy wynalazek należy do dziedziny techniki ekstrakcji odpowiednich składników z rodzaju Agaricus i w szczególności dotyczy sposobu ekstrakcji polisacharydu Agaricus bisporus.

Technologia tła

Agaricus bisporus, znany również w języku chińskim jako grzyb, grzyb obcy, grzyb biały itp., jest często nazywany za granicą pospolitym grzybem uprawnym lub pieczarką. Agaricus bisporus należy do Eumycota, Basidiomycotina, Hymenomycetes w taksonomii. Medycyna chińska uważa, że ​​Agaricus bisporus jest z natury chłodny, słodki w smaku i nietoksyczny. Grzyby dostają się do jelit, żołądka i płuc i mają działanie pobudzające, regulujące qi, usuwające flegmę, przyjemne dla umysłu, detoksykujące, usuwające wysypki, powstrzymujące wymioty, zatrzymujące biegunkę, trawiące jedzenie, oczyszczające umysł i uspokajające yang wątroby. Stosuje się go głównie w leczeniu zmęczenia i niedoboru qi w środkowych i późnych stadiach gorączki, suchości w ustach, braku apetytu, zahamowań żołądkowo-jelitowych, wymiotów, biegunki, kaszlu z flegmą i słabej wysypki u dzieci. Współczesne badania pokazują, że Agaricus bisporus jest bogaty w białko, polisacharydy, witaminy, składniki odżywcze i nawozy. Jest nie tylko pożywny i pyszny, ale ma także działanie przeciwnowotworowe, przeciwstarzeniowe, przeciwutleniające i regulujące układ odpornościowy. Polisacharydy Agaricus bisporus mają działanie fizjologiczne, takie jak działanie przeciwbakteryjne, przeciwutleniające, wzmacniające odporność i hamowanie insuliny. Rozwój i wykorzystanie polisacharydów Agaricus bisporus oraz badanie ich funkcji odżywczych i zdrowotnych będą głównymi punktami przyszłych badań nad Agaricus bisporus.

Aby rozwiązać problemy mocnych kwasów i mocnych zasad w istniejącej technologii, które łatwo niszczą strukturę polisacharydów, ekstrakcja obejmuje etapy o wysokiej wydajności, złożony proces i niską czystość polisacharydów; Celem niniejszego wynalazku jest zapewnienie sposobu ekstrakcji polisacharydów Agaricus bisporus wspomaganą sondą, to znaczy zapewnienie nowego sposobu ekstrakcji polisacharydów Agaricus bisporus, który jest wydajny, energooszczędny i przyjazny dla środowiska.

Schemat techniczny osiągnięcia celu niniejszego wynalazku jest następujący:

Sposób wytwarzania polisacharydu Agaricus bisporus wspomaganego starterem obejmuje następujące etapy:

(1) Weź małe kawałki świeżego Agaricus bisporus, zmiażdż w temperaturze 60°C, aby uzyskać rozdrobniony materiał;

(2) Dodaj wodę dejonizowaną do pokruszonego materiału z etapu (1) w zbiorniku reakcyjnym z sondą zgodnie ze stosunkiem wody do materiału 10-50 mL/g dla ekstrakcji gorącą wodą, temperatura ekstrakcji wynosi 20-80°C, czas to 10-50 min, a moc ultradźwięków to 80-200 w, aby otrzymać ekstrakt;

(3) Odwirować ekstrakt z etapu (2) i pobrać supernatant. Warunki wirowania są następujące: 5000 obr./min, 15 min; osad ekstrahuje się ponownie tą samą metodą, odwirowuje, pobiera supernatant i łączy oba supernatanty;

(4) Zatężyć supernatant z etapu (3) w temperaturze 50°C do 1/10 pierwotnej objętości, aby otrzymać stężony roztwór; do stężonego roztworu do wytrącania dodać 3-krotną objętość bezwodnego etanolu przez 15-2 0h, wirować przy 5000 obr/min przez 15min i usunąć osad;

(5) Osad z etapu (4) odbiałcza się metodą Sevag.

Przy stężeniu 5 mg/ml osad z etapu (4) rozpuszcza się w jonach, a następnie dodaje się 1/5 objętości mieszaniny chloroformu i n-butanolu, a stosunek chloroformu do n-butanolu wynosi 5:1; wytrząsać na wytrząsarce przy 170 obrotach na minutę przez 20-30 minut, odstawić na 20-30 minut i nałożyć warstwy, aby utworzyć fazę niższy rozpuszczalnik organiczny-białko; supernatant jest wielokrotnie odbiałczany 4-6 razy tą samą metodą i nie ma stabilności warstwy białkowej pomiędzy górną i dolną powierzchnią cieczy roztworu, a supernatant zbiera się;

(6) Supernatant z etapu (5) zatęża się do 1/5 pierwotnej objętości w temperaturze 50°C w celu otrzymania stężonego roztworu; Do stężonego roztworu w celu wytrącenia dodaje się 9-krotną objętość bezwodnego etanolu przez 15-20 godzin, wiruje przy 5000 obr./min przez 15 minut i zbiera osad;

(7) Osad z etapu (6) odbiałcza się makroporowatą żywicą. Sposób usuwania pigmentu

Do osadu z etapu (6) dodać zjonizowany roztwór wodny o stężeniu 2 mg/ml, dodać 1 g żywicy makroporowatej AB-8 na każde 5 ml roztworu, wytrząsać na wytrząsarce przy 170 obr./min przez 12 godzin, odstawić w celu usunięcia makroporowatej żywicy zaadsorbowanej pigmentem i zebrać supernatant;

(8) Zatężyć supernatant z etapu (7) w temperaturze 50°C i wysuszyć pod próżnią w temperaturze 60°C w celu otrzymania ekstraktu polisacharydu Agaricus bisporus;

Ekstrakt polisacharydowy Agaricus bisporus jest jasnobrązowym proszkiem, w którym zawartość polisacharydów waha się od 52,89% do 75,48%.

Zoptymalizowane warunki powyższego etapu (2) to stosunek wody do materiału wynoszący 30 ml/g, temperatura ekstrakcji 65 ℃, czas ekstrakcji 40 minut i moc ultradźwiękowa 170 w.

W porównaniu z procesem ujawnionym w chińskim patencie nr 200810222270.1, sposób według niniejszego wynalazku ma następujące zalety: 

① Wartość pH metody aplikacji podczas ekstrakcji wynosi 9, a wartość pH podczas odbarwiania wynosi 4. Takie działanie mocnego kwasu i silnej zasady może łatwo zniszczyć strukturę polisacharydów; wartość pH w sposobie według niniejszego wynalazku podczas ekstrakcji jest prawie obojętna, a warunki są łagodne i nie zniszczą struktury polisacharydów. 

② Metoda nie powoduje odbiałczenia podczas procesu ekstrakcji, a czystość polisacharydów w ekstrakcie nie jest wysoka (nie jest gwarantowana); w procesie ekstrakcji tą metodą wykorzystuje się metodę Sevag do deproteinizacji, a polisacharydy w ekstrakcie są dokładnie odwrotne, czyli 7. Proces według niniejszego wynalazku ma następujące zalety w porównaniu z procesem ujawnionym w chińskim zgłoszeniu patentowym nr 200910151176.6: Metoda obejmuje bardziej złożone procesy obróbki enzymatycznej, obróbki mikrofalowej i filtracji membranowej niż etapy ekstrakcji w tej metodzie, a metoda obejmuje więcej procesu utleniającego niż metoda ekstrakcji. Dodatkowo w obu opatentowanych metodach surowcem ekstrakcyjnym są świeże nasiona Agaricus bisporus, na które łatwo wpływa sezon produkcyjny; metoda wykorzystuje suszone i rozdrobnione nasiona Agaricus bisporus jako skuteczny surowiec o ograniczonej ekstrakcji, który może przezwyciężyć problem stosowania świeżych surowców pod wpływem sezonu produkcyjnego.

Ekstrakt polisacharydowy A garicus bisporus jest lekkim proszkiem kobaltu, w którym zawartość polisacharydów waha się od 52,89% do 75,48%.