Jak používat ultrazvuk k podpoře extrakce houbových polysacharidů?

Jak pomocí ultrazvuku napomoci extrakci polysacharidů houby Agaricus bisporus?

Technický obor

[0001] Předkládaný vynález patří do technické oblasti extrakce relevantních složek z rodu Agaricus a konkrétně se týká způsobu extrakce polysacharidu Agaricus bisporus.

Pozadí technologie

Agaricus bisporus, v čínštině také známý jako houba, cizí houba, bílá houba atd., se v zahraničí často nazývá běžná pěstovaná houba nebo hřib. Agaricus bisporus patří v taxonomii k Eumycota, Basidiomycotina, Hymenomycetes. Čínská medicína věří, že Agaricus bisporus je chladivé povahy, sladké chuti a netoxický. Houby se dostávají do střev, žaludku a plic a mají účinky, že chutnají, regulují čchi, řeší hleny, potěšují mysl, detoxikují, odstraňují vyrážky, zastavují zvracení, zastavují průjem, tráví jídlo, pročišťují mysl a zklidňují jang jater. Používá se hlavně k léčbě únavy a nedostatku qi ve středních a pozdních stádiích horečky, sucha v ústech, špatné chuti k jídlu, gastrointestinální inhibice, zvracení, průjmu, kašle s hlenem a špatné vyrážky u dětí. Moderní výzkumy ukazují, že Agaricus bisporus je bohatý na bílkoviny, polysacharidy, vitamíny, živiny a hnojiva. Je nejen výživný a lahodný, ale má také protinádorové, anti-agingové, antioxidační a imunitní regulační funkce. Polysacharidy Agaricus bisporus mají fyziologické účinky, jako jsou antibakteriální, antioxidační, imunitní posílení a inhibice inzulínu. Vývoj a využití polysacharidů Agaricus bisporus a studium jejich nutričních a zdravotních funkcí budou horkými místy pro budoucí výzkum Agaricus bisporus.

Aby se vyřešily problémy silné kyseliny a silné zásady ve stávající technologii, která snadno ničí strukturu polysacharidů, extrakce vysoce účinných kroků, složitý proces a nízká čistota polysacharidů; účelem předkládaného vynálezu je poskytnout způsob extrakce polysacharidů Agaricus bisporus za pomoci sondy, to znamená poskytnout nový způsob extrakce polysacharidů Agaricus bisporus, který je účinný, energeticky úsporný a šetrný k životnímu prostředí.

Technické schéma pro dosažení účelu tohoto vynálezu je následující:

Způsob pro polysacharid Agaricus bisporus s pomocí primeru zahrnuje následující kroky:

(1) Vezměte malé kousky čerstvé pevné látky Agaricus bisporus, rozdrťte při 60 °C, abyste získali drcený materiál;

(2) Přidejte deionizovanou vodu k rozdrcenému materiálu z kroku (1) v reakční nádrži sondy podle poměru vody k materiálu 10-50 ml/g pro extrakci horkou vodou, teplota extrakce je 20-80 °C, doba je 10-50 minut a výkon ultrazvuku je 80-200 W pro získání extraktu;

(3) Odstřeďte extrakt z kroku (2) a odeberte supernatant, podmínky odstřeďování jsou: 5000 ot./min, 15 min; sraženina se znovu extrahuje stejným způsobem, odstředí se a odebere se supernatant a dva supernatanty se spojí;

(4) Zakoncentrujte supernatant z kroku (3) při teplotě 50 °C až 1/10 původního objemu, abyste získali koncentrovaný roztok; přidejte 3násobek objemu bezvodého ethanolu do koncentrovaného roztoku pro srážení po dobu 15-2 hodin, odstřeďujte při 5000 ot./min po dobu 15 minut a vyjměte sraženinu;

(5) Sraženina z kroku (4) se deproteinuje metodou Sevag.

Při koncentraci 5 mg/ml se sraženina z kroku (4) rozpustí ionty a poté se přidá 1/5 objemu směsi chloroformu a n-butanolu a poměr chloroformu k n-butanolu je 5:1; třepat na třepačce při 170 ot./min po dobu 20-30 minut, stát 20-30 minut a vrstvit, aby se vytvořila fáze nižší organické rozpouštědlo-protein; supernatant se opakovaně deproteinuje 4-6krát stejným způsobem a mezi horním a spodním povrchem kapaliny není žádná stabilita proteinové vrstvy a supernatant se shromáždí;

(6) Supernatant z kroku (5) se koncentruje na 1/5 původního objemu při teplotě 50 °C, aby se získal koncentrovaný roztok; 9násobný objem bezvodého ethanolu se přidá ke koncentrovanému roztoku za účelem srážení po dobu 15-20 hodin, odstřeďuje se při 5000 ot./min po dobu 15 minut a odebere se sraženina;

(7) Sraženina z kroku (6) se deproteinuje metodou makroporézní pryskyřice pro odstranění pigmentu

Přidejte ionizovaný vodný roztok ke sraženině z kroku (6) v koncentraci 2 mg/ml, přidejte 1 g makroporézní pryskyřice AB-8 do každých 5 ml roztoku, protřepávejte na třepačce při 170 otáčkách za minutu po dobu 12 hodin, nechte stát, aby se odstranila makroporézní pryskyřice adsorbovaná pigmentem, a shromážděte supernatant;

(8) Supernatant z kroku (7) se koncentruje při teplotě 50 °C a suší se ve vakuu při teplotě 60 °C, aby se získal polysacharidový extrakt Agaricus bisporus;

Tento polysacharidový extrakt Agaricus bisporus je světle hnědý prášek, ve kterém se obsah polysacharidů pohybuje od 52,89 % do 75,48 %.

Optimalizované podmínky výše uvedeného kroku (2) jsou poměr vody k materiálu 30 ml/g, teplota extrakce 65 °C, doba extrakce 40 minut a výkon ultrazvuku 170 W.

Ve srovnání se způsobem popsaným v čínském patentu č. 200810222270.1 má způsob podle předkládaného vynálezu následující výhody: 

① Hodnota pH aplikační metody během extrakce je 9 a hodnota pH během odbarvování je 4. Takový silný kyselý a silný alkalický provoz může snadno zničit strukturu polysacharidů; hodnota pH způsobu podle předkládaného vynálezu během extrakce je téměř neutrální a podmínky jsou mírné a nezničí strukturu polysacharidů. 

② Metoda neprovádí deproteinizaci během procesu extrakce a čistota polysacharidů v extraktu není vysoká (není zaručena); extrakční proces této metody používá k deproteinizaci metodu Sevag a polysacharidů v extraktu je pravý opak, což je 7. Proces podle předkládaného vynálezu má následující výhody ve srovnání s procesem popsaným v čínské patentové přihlášce č. 200910151176.6: Metoda má složitější enzymatické zpracování, mikrovlnnou úpravu a procesy membránové filtrace, než extrakční metoda a extrakční proces má více kroků než tato metoda extrakce. Oba dva patentované způsoby navíc využívají jako extrakční surovinu čerstvá semena Agaricus bisporus, která je snadno ovlivnitelná produkční sezónou; metoda využívá sušená a drcená semena Agaricus bisporus jako efektivní omezenou extrakční surovinu, která může překonat problém s použitím čerstvých surovin ovlivněných produkční sezónou.

Polysacharidový extrakt A garicus bisporus je lehký kobaltový prášek, kde se obsah polysacharidu pohybuje od 52,89 % do 75,48 %.