Hvordan man bruger ultralyd til at hjælpe med udvinding af svampepolysaccharider?

Hvordan bruger man ultralyd til at hjælpe med udvinding af svampe Agaricus bisporus polysaccharides?

Teknisk område

Den foreliggende opfindelse hører til det tekniske område for ekstraktion af relevante komponenter fra slægten Agaricus og angår specifikt en fremgangsmåde til ekstraktion af Agaricus bisporus polysaccharid.

Baggrundsteknologi

Agaricus bisporus, også kendt som champignon, fremmed svamp, hvid champignon osv. på kinesisk, kaldes ofte almindelig dyrket svamp eller knapsvamp i udlandet. Agaricus bisporus hører til Eumycota, Basidiomycotina, Hymenomycetes i taksonomi. Kinesisk medicin mener, at Agaricus bisporus er kølig af natur, sød i smagen og ikke-giftig. Svampe trænger ind i tarmene, maven og lungerne og har virkningerne af appetitlige, regulerende qi, løse slim, behage sindet, afgifte, fjerne udslæt, stoppe opkastning, stoppe diarré, fordøje mad, rense sindet og berolige leverens yang. Det bruges hovedsageligt til at behandle træthed og qi-mangel i de midterste og sene stadier af feber, mundtørhed, dårlig appetit, gastrointestinal hæmning, opkastning, diarré, hoste med slim og dårligt udslæt hos børn. Moderne forskning viser, at Agaricus bisporus er rig på protein, polysaccharider, vitaminer, næringsstoffer og gødning. Det er ikke kun nærende og lækkert, men har også anti-tumor, anti-aging, antioxidant og immunregulerende funktioner. Agaricus bisporus polysaccharider har fysiologiske virkninger såsom antibakteriel, antioxidant, immunforstærkning og insulinhæmning. Udviklingen og udnyttelsen af ​​Agaricus bisporus polysaccharider og undersøgelsen af ​​deres ernæringsmæssige og sundhedsmæssige funktioner vil være hot spots for fremtidig forskning om Agaricus bisporus.

For at løse problemerne med stærk syre og stærk alkali i den eksisterende teknologi, der let ødelægger strukturen af ​​polysaccharider, ekstraktion af højeffektive trin, kompleks proces og lav renhed af polysaccharider; formålet med den foreliggende opfindelse er at tilvejebringe en fremgangsmåde til probe-assisteret ekstraktion af Agaricus bisporus polysaccharides, det vil sige at tilvejebringe en ny fremgangsmåde til ekstraktion af Agaricus bisporus polysaccharider, som er effektiv, energibesparende og miljøvenlig.

Den tekniske plan for at opnå formålet med den foreliggende opfindelse er som følger:

En fremgangsmåde til primer-assisteret Agaricus bisporus polysaccharid omfatter følgende trin:

(1) Tag små stykker frisk Agaricus bisporus faste stoffer, knus ved 60°C for at opnå knust materiale;

(2) Tilsæt deioniseret vand til det knuste materiale fra trin (1) i en probereaktionstank i henhold til et vand-til-materiale-forhold på 10-50 ml/g for varmtvandsekstraktion, ekstraktionstemperaturen er 20-80°C, tiden er 10-50 min, og ultralydseffekten er 80-200w for at opnå et ekstrakt;

(3) Centrifuger ekstraktet fra trin (2) og tag supernatanten, centrifugeringsbetingelserne er: 5000 rpm, 15 min; bundfaldet ekstraheres igen ved samme metode, centrifugeres, og supernatanten udtages, og de to supernatanter kombineres;

(4) Koncentrer supernatanten fra trin (3) ved en temperatur på 50°C til 1/10 af det oprindelige volumen for at opnå en koncentreret opløsning; tilsæt 3 gange mængden af ​​vandfri ethanol til den koncentrerede opløsning til udfældning i 15-2 0 timer, centrifuger ved 5000 rpm i 15 minutter, og tag bundfaldet ud;

(5) Bundfaldet fra trin (4) afproteiniseres ved Sevag-metoden.

Ved en koncentration på 5 mg/ml opløses bundfaldet fra trin (4) af ioner, og derefter tilsættes 1/5 af volumenet af chloroform og n-butanolblanding, og forholdet mellem chloroform og n-butanol er 5:1; ryst på en rystemaskine ved 170 rpm i 20-30 minutter, lad stå i 20-30 minutter, og lag sammen til dannelse af en lavere organisk opløsningsmiddel-proteinfase; supernatanten deproteiniseres gentagne gange 4-6 gange ved den samme metode, og der er ingen proteinlagsstabilitet mellem opløsningens øvre og nedre væskeoverflader, og supernatanten opsamles;

(6) Supernatanten fra trin (5) koncentreres til 1/5 af det oprindelige volumen ved en temperatur på 50 ℃ for at opnå en koncentreret opløsning; 9 gange volumenet af vandfri ethanol tilsættes til den koncentrerede opløsning til udfældning i 15-20 timer, centrifuger ved 5000 rpm i 15 minutter, og bundfaldet udtages;

(7) Bundfaldet fra trin (6) deproteiniseres ved en makroporøs harpiksmetode til pigmentfjernelse

Tilsæt ioniseret vandig opløsning til bundfaldet fra trin (6) i en koncentration på 2 mg/ml, tilsæt 1 g AB-8 makroporøs harpiks til hver 5 ml af opløsningen, ryst på en ryster ved 170 rpm i 12 timer, lad stå for at fjerne den makroporøse harpiks adsorberet med pigment, og opsaml supernatanten;

(8) Koncentrer supernatanten fra trin (7) ved en temperatur på 50 ℃ og vakuumtør ved en temperatur på 60 ℃ for at opnå Agaricus bisporus polysaccharidekstrakt;

Denne Agaricus bisporus polysaccharidekstrakt er et lysebrunt pulver, hvori polysaccharidindholdet varierer fra 52,89% til 75,48%.

De optimerede betingelser i ovenstående trin (2) er et vand-til-materiale-forhold på 30 ml/g, en ekstraktionstemperatur på 65 ℃, en ekstraktionstid på 40 minutter og en ultralydseffekt på 170 w.

Sammenlignet med fremgangsmåden beskrevet i kinesisk patent nr. 200810222270.1 har fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse følgende fordele: 

① pH-værdien af ​​påføringsmetoden under ekstraktion er 9, og pH-værdien under affarvning er 4. Sådan stærk syre- og stærk alkalidrift kan let ødelægge strukturen af ​​polysaccharider; pH-værdien af ​​fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse under ekstraktion er næsten neutral, og betingelserne er milde og vil ikke ødelægge strukturen af ​​polysaccharider. 

② Metoden udfører ikke deproteinisering under ekstraktionsprocessen, og renheden af ​​polysaccharider i ekstraktet er ikke høj (ikke garanteret); ekstraktionsprocessen i denne metode anvender Sevag-metoden til deproteinisering, og polysacchariderne i ekstraktet er lige det modsatte, hvilket er 7. Fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse har følgende fordele sammenlignet med den proces, der er beskrevet i kinesisk patentansøgning nr. 200910151176.6: Metoden har mere kompleks enzymbehandling, membran-ekstraktions- og membranbehandlings- og membranbehandlingstrin for denne metode end denne metode. metoden har mere oxidantproces end ekstraktionsmetoden. Derudover bruger begge de to patenterede metoder friske Agaricus bisporus frø som ekstraktionsråmateriale, som let påvirkes af produktionssæsonen; metoden anvender tørrede og knuste Agaricus bisporus frø som det effektive begrænsede udvindingsråmateriale, der kan overvinde problemet med at bruge friske råvarer, der påvirkes af produktionssæsonen.

A garicus bisporus polysaccharidekstraktet er et let koboltpulver, hvor polysaccharidindholdet varierer fra 52,89 % til 75,48 %.